简要描述:
使用及效果:将PCR检测试剂盒说明书与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
更新时间:2024-09-01;厂商性质:经销商;览量:1532
本产品是即用型PCR试剂盒的改良产品,含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、上样染料等所有PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR反应,具有广泛的用途。
1.方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR实验。
2.快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3.本产品A型含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4.由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA样品。
5.产物可直接用于T载体克隆,不需要额外的加A反应。
使用及效果:将本产品15 μL与用户自备的模板,引物和水共15 μL混合后,直接进行PCR反应(PCR参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL电泳检查扩增结果。
以下是PCR检测试剂盒说明书的产品介绍:
产品名称 |
英文名称 |
分类 |
PCR检测试剂盒说明书 |
Salmonella typhiPCR |
PCR检测试剂盒 |
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml(不要少于0.3ml)200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
使用及效果:
PCR反应特点
(1)特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2)灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3)简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4)对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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我公司即用型PCR试剂盒:
运输及保存:低温运输、-20℃保存,有效期一年。